Show simple item record

INDICATORS OF CELL CYCLE AND DNA FRAGMENTATION OF SPLEEN CELLS IN EARLY TERMS AFTER THERMAL BURNS OF SKIN ON THE BACKGROUND OF USING "LACTOPROTEIN WITH SORBITOL" OR HAES-LX-5 %

ПОКАЗАТЕЛИ КЛЕТОЧНОГО ЦИКЛА И ФРАГМЕНТАЦИИ ДНК-КЛЕТОК СЕЛЕЗЕНКИ В РАННИЕ СРОКИ ПОСЛЕ ТЕРМИЧЕСКОГО ОЖОГА КОЖИ НА ФОНЕ ВВЕДЕНИЯ ЛАКТОПРОТЕИНА С СОРБИТОЛОМ ИЛИ HAES-LX-5 %;
ПОКАЗНИКИ КЛІТИННОГО ЦИКЛУ І ФРАГМЕНТАЦІЇ ДНК-КЛІТИН СЕЛЕЗІНКИ В РАННІ ТЕРМІНИ ПІСЛЯ ТЕРМІЧНОГО ОПІКУ ШКІРИ НА ФОНІ ВВЕДЕННЯ ЛАКТОПРОТЕЇНУ З СОРБІТОЛОМ АБО HAES-LX-5 %

dc.creatorOcheretna, N. P.
dc.creatorGuminskiy, Yu. I.
dc.creatorGunas, I. V.
dc.date2018-04-28
dc.date.accessioned2020-02-20T09:14:34Z
dc.date.available2020-02-20T09:14:34Z
dc.identifierhttps://ojs.tdmu.edu.ua/index.php/visnyk-nauk-dos/article/view/8627
dc.identifier10.11603/2415-8798.2018.1.8627
dc.identifier.urihttps://repository.tdmu.edu.ua/handle/123456789/12652
dc.descriptionIn the scientific literature, there is no research data relative performance characteristics of the cell cycle and DNA fragmentation spleen cells after thermal skin burn on the background of the introduction of hyperosmolar infusion solutions.The aim of the study – is to establish the characteristics of the cell cycle and fragmentation of the cells of the spleen after 1, 3 and 7 days after burn injuries of the skin with the introduction of solutions of "lactoprotein with sorbitol" or HAES -LX -5 %.Materials and Metohods. The research was carried out on laboratory white rats males weighing 155–160 g, obtained from the vivarium of the Institute of Pharmacology and Toxicology of the Academy of Medical Sciences of Ukraine. The rats were divided into 6 groups in the experiment: 1, 2 and 3 groups – rats without thermal trauma, which were infused with 0.9 % NaCl solution, "lactoprotein with sorbitol" and HAES -LX -5% in dose 10 ml per kg. In the 4, 5 and 6 groups 0.9 % NaCl solution, "lactoprotein with sorbitol" and HAES -LX -5 % in a dose of 10 ml per kg after skin burning were administered to the rats. Burn skin damage was caused by applying to the pre-depilated lateral surfaces of the trunk of the rats for 10 seconds four copper plates (two plates on each side, each with a surface area of 13.86 cm2) which were preheated for 6 minutes in constant temperature water 100 ºC. Shaving of the lateral surfaces of the trunk of the rat, catheterization of the veins, staining of skin burns and decapitation of the animals was carried out under conditions of intravenous propofol anesthesia (at the rate of 60 mg/kg of animal weight). The DNA content of the rat spleen cell nuclei was determined by flow cytometry at the Partec multifunctional flow cytometer "Partec PAS ". UV radiation was used to stimulate DAP I fluorescence. From each sample of the nucleic suspension of the analysis subject to 20 thousand events. Cellular analysis of the cells was carried out using FloMax software (Partec, Germany) in full numeric matching according to the mathematical model, which determined: G0G1 – percentage ratio of G0G1 phase cells to all cells of the cell cycle (DNA content = 2c); S – percentage ratio of the phase of DNA synthesis to all cells of the cell cycle (DNA content > 2c and < 4c); G2 + M - percentage ratio of the G2 + M phase to all cells of the cell cycle (DNA = 4c); IP - the index of proliferation, which is determined by the sum of the indices S + G2 + M; BP – block of proliferation, which is evaluated by the ratio S / (G2 + M); SUB -G0G1 is an interval on the DNA histograms RN 1 before the peak G0G1, which indicates the cell nuclei containing DNA < 2c (DNA fragmentation detection). The statistical processing of the obtained results was carried out in the licensed package "Statistica 6.1" with the use of nonparametric methods for evaluating the results.Results and Discussion. In the application of the solution of "lactoprotein with sorbitol", after 1 day after burn skin damage, bigger mean values of the S-phase (39.4 %, p <0.05) were observed in comparison with the burn group after correction by 0.9 % NaCl solution, however, they remain significantly lower (by 35.4 %, p <0.05) relative to the mean values of this indicator in groups without burn injury. Also, higher values of the index of proliferation (38.6 %, p = 0.076) in the burn group + "lactoprotein with sorbitol" compared with the burn group + 0.9 % NaCl solution were observed. At the same time, when using HAES -LX -5 % against the background of skin burns, compared with similar indicators of the burn group + 0.9 % NaCl solution, the indexes of the G0G1 phases were significantly lower (by 4.8 %, p <0.05 ) and the interval of SUB -G0G1 (by 34.9 %, p <0.01) and higher S-phases (by 41.1 %, p <0.05) and the proliferation index (by 32.7 %, p < 0.05). When comparing the cell cycle parameters of the spleen cells between the groups of burn + "lactoprotein with sorbitol" and burn + HAES -LX -5%, after 1 day of the experiment, only a significant (p <0.05) by 30.3 % lower values of the SUB - G0G1 established when applied with HAES -LX -5%. Thus, after 1 day after burning the skin, "lactoprotein with sorbitol" had a more significant effect on synthetic processes, and HAES -LX -5 % – on processes both DNA synthesis and apoptosis compared with the use of 0.9 % NaCl solution. A similar picture of the nature of the effect of these drugs on the cell cycle parameters of the spleen cells was observed after 3 and 7 days after the burn injury of the skin. In particular, in comparison with the indicators of 0.9 % NaCl solution without burn after 3 days, on the background of burn and correction with the drug "lactoprotein with sorbitol" the average values of the proliferation block were higher, and on the background of correction with HAES -LX -5 % higher become the average values of the parameters of phase S and the block of proliferation and smaller – interval SUB -G0G1. It should be noted that only on the background of HAES -LX -5 % average values of the phase S indicators were significantly higher at the given time relative to the same indicator of burn groups + 0.9 % NaCl solution and burn + "lactoprotein with sorbitol". This indicates that at the time of the experiment HAES -LX -5 % more clearly contributed to the renewal of the cell population by stimulating DNA synthesis against the background of enhanced apoptosis in the background of burn injury. After 7 days after skin burn, there were no differences in the effect on the parameters of the cell cycle of the spleen cells between the drugs "lactoprotein with sorbitol" and HAES -LX -5 %. However, in both of these groups, higher mean values of the S-phase, the proliferation block and SUB -G0G1 intervals were found to be higher than the average values of similar burn group parameters + 0.9 % NaCl solution.Conclusions. The use of "lactoprotein with sorbitol" or HAES -LX -5 % solutions on the background of burn infections of the skin contributes to a more effective process for the renewal of the spleen cells by stimulating the synthesis of DNA and lower apoptosis level, especially with the use of HAES -LX -5 %.en-US
dc.descriptionВ научной литературе отсутствуют данные относительно исследований особенностей показателей клеточного цикла и фрагментации ДНК-клеток селезенки после термического ожога кожи на фоне введения инфузионных гиперосмолярных растворов.Цель исследования – установить особенности показателей клеточного цикла и фрагментации ДНК клеток селезенки через 1; 3 и 7 суток после ожогового повреждения кожи на фоне введения растворов лактопротеина с сорбитолом или HAES -LX -5 %.Материалы и методы. Исследования выполнены на лабораторных белых крысах-самцах массой 155–160 г, полученных из вивария ГУ “Институт фармакологии и токсикологии АМН Украины”. Крыс распределили в эксперименте на 6 групп: первая, вторая и третья – крысы без термической травмы, которым проводили инфузию 0,9 % раствора NaCl, лактопротеина с сорбитолом и HAES -LX -5 % в дозе 10 мл на кг. В четвёртой, пятой и шестой группах крысам проводили инфузию 0,9 % раствора NaCl, лактопротеина с сорбитолом и HAES -LX -5 % в дозе 10 мл на кг после ожога кожи. Ожоговое повреждение кожи вызвали путем приложения к предварительно выбритым боковым поверхностям туловища крыс на 10 с четырех медных пластинок (по две пластины с каждой стороны, каждая с площадью поверхности по 13,86 см2), которые предварительно в течение 6 м нагревали в воде с постоянной температурой 100 ºС. Бритье боковых поверхностей туловища крыс, катетеризацию вен, постановку ожогов кожи и декапитацию животных проводили в условиях внутривенного пропофолового наркоза (из расчета 60 мг/кг массы животного). Содержание ДНК в ядрах клеток селезенки крыс определялось методом проточной цитометрии на многофункциональном научно-исследовательском проточном цитометре “Partec PAS ” фирмы Partec. Для возбуждения флуоресценции DAP I применялось УФ-излучение. С каждого образца нуклеарной суспензии анализу подлежало 20 тыс. событий. Циклический анализ клеток выполнялся средствами программного обеспечения FloMax (Partec, Германия) в полном цифровом соответствии согласно математической модели, где определялись: G0G1 – процентное соотношение клеток фазы G0G1 ко всем клеткам клеточного цикла (содержание ДНК = 2c); S – процентное соотношение фазы синтеза ДНК ко всем клеткам клеточного цикла (со-держание ДНК > 2c и < 4c); G2 + M – процентное соотношение фазы G2 + M ко всем клеткам клеточного цикла (ДНК = 4c); IP – индекс пролиферации, что определяется по сумме показателей S + G2 + M; ВР – блок пролиферации, который оценивается по соотношению S / (G2 + M); SUB -G0G1 – интервал на ДНК-гистограммах RN 1 перед пиком G0G1, указывающий на ядра клеток с содержанием ДНК < 2с (определение фрагментации ДНК). Статистическую обработку полученных результатов проводили в лицензионном пакете Statistica 6.1 с применением непараметрических методов оценки полученных результатов.Результаты исследований и их обсуждение. При применении раствора лактопротеина с сорбитолом через 1 сутки после ожогового поражения кожи наблюдаются большие средние значения показателя S-фазы (на 39,4 %, р<0,05), по сравнению с группой после ожога с коррекцией 0,9 % раствора NaCl, однако они остаются значительно меньше (на 35,4 %, р<0,05) относительно средних значений данного показателя в группе без ожогового повреждения. Также наблюдаются большие значения индекса пролиферации (на 38,6 %, р=0,076) в группе “ожог + лактопротеин с сорбитолом” по сравнению с группой ожог + 0,9 % раствора NaCl”. В этот же срок наблюдения при применении HAES -LX -5 % на фоне ожога кожи по сравнению с аналогичными показателями группы “ожог + 0,9 % раствора NaCl”, существенно меньшими оказались показатели фаз G0G1 (на 4,8 %, р <0,05) и интервала SUB -G0G1 (на 34,9 %, р<0,01) и большими показатели S-фазы (на 41,1 %, р<0,05) и индекс пролиферации (на 32,7 %, р<0,05). При сравнении показателей клеточного цикла клеток селезенки между группами “ожог + лактопротеин с сорбитолом” и “ожог + HAES -LX -5 %” через 1 сутки эксперимента установлено только достоверно (р<0,05) на 30,3 % меньшие значения интервала SUB - G0G1 при применении HAES -LX -5 %. Таким образом, уже через 1 сутки после ожога кожи лактопротеином с сорбитолом более существенно влиял на синтетические процессы, а HAES -LX -5 % – на процессы как синтеза ДНК, так и апоптоза по сравнению с применением 0,9 % раствора NaCl. Подобная картина по характеру воздействия данных препаратов на показатели клеточного цикла клеток селезенки была и через 3 и 7 суток после ожогового поражения кожи. В частности, по сравнению с показателями группы “0,9 % раствора NaCl без ожога” через 3 суток, на фоне ожога и коррекции раствором лактопротеина с сорбитолом большими оказались средние значения блока пролиферации, а на фоне коррекции раствором HAES -LX -5 % большими стали средние значения показателей S-фазы и блока пролиферации и меньшими – интервала SUB -G0G1. Через 7 суток после ожога кожи различий во влиянии на показатели клеточного цикла клеток селезенки между растворами лактопротеина с сорбитолом и HAES -LX -5 % мы не обнаружили. Однако в обоих этих группах были установлены большие средние значения показателей S-фазы, блока пролиферации и интервала SUB -G0G1 по сравнению со средними значениями аналогичных показателей группы “ожог + 0,9 % раствора NaCl”.Выводы. Применение растворов лактопротеина с сорбитолом или HAES -LX -5 % на фоне ожогового повреждения кожи способствуют более эффективному процессу обновления клеток селезенки путем стимуляции синтеза ДНК и меньшего уровня апоптоза, особенно при применении HAES -LX -5 %.ru-RU
dc.descriptionВ науковій літературі відсутні дані відносно досліджень особливостей показників клітинного циклу і фрагментації ДНК-клітин селезінки після термічного опіку шкіри на тлі введення інфузійних гіперосмолярних розчинів.Мета дослідження – встановити особливості показників клітинного циклу і фрагментації ДНК-клітин селезінки через 1; 3 і 7 діб після опікового ушкодження шкіри на тлі введення розчинів лактопротеїну з сорбітолом або HAES -LX -5 %.Матеріали і методи. Дослідження виконано на лабораторних білих щурах-самцях масою 155–160 г, отриманих з віварію ДУ “Інститут фармакології та токсикології АМН України”. Щурів поділили в експерименті на 6 груп: перша, друга і третя групи – щури без термічної травми, яким проводили інфузію 0,9 % розчину NaCl, лактопротеїну з сорбітолом та HAES -LX -5 % у дозі 10 мл на кг. У четвертій, п’ятій і шостій групах щурам проводили інфузію 0,9 % розчину NaCl, лактопротеїну з сорбітолом та HAES -LX -5 % у дозі 10 мл на кг після опіку шкіри. Опікове ушкодження шкіри викликали шляхом прикладання до попередньо депільованих бічних поверхонь тулуба щурів на 10 с чотирьох мідних пластинок (по дві пластини з кожного боку, кожна з площею поверхні по 13,86 см2), які попередньо упродовж 6 хв нагрівали у воді з постійною температурою 100 ºС. Гоління бокових поверхонь тулуба щурів, катетеризацію вен, постановку опіків шкіри та декапітацію тварин проводили в умовах внутрішньовенного пропофолового наркозу (із розрахунку 60 мг/кг маси тварини). Вміст ДНК в ядрах клітин селезінки щурів визначали методом проточної цитометрії на багатофункціональному науково-дослідному проточному цитометрі “Partec PAS ” фірми Partec. Для збудження флуоресценції DAP I застосовувалb УФ-випромінювання. З кожного зразка аналізу нуклеарної суспензії підлягало 20 тис. подій. Циклічний аналіз клітин виконували засобами програмного забезпечення FloMax (Partec, Німеччина) у повній цифровій відповідності згідно з математичною моделлю, де визначали: G0G1 – відсоткове співвідношення клітин фази G0G1 до всіх клітин клітинного циклу (вміст ДНК = 2c); S – відсоткове співвідношення фази синтезу ДНК до всіх клітин клітинного циклу (вміст ДНК > 2c та < 4c); G2+M – відсоткове співвідношення фази G2+M до всіх клітин клітинного циклу (ДНК=4c); IP – індекс проліферації, що визначається за сумою показників S+G2+M; ВР – блок проліферації, який оцінюють за співвідношенням S/(G2+M); SUB -G0G1 – інтервал на ДНК-гістограмах RN 1 перед піком G0G1, який вказує на ядра клітин із вмістом ДНК<2с (визначення фрагментації ДНК). Cтатистичну обробку отриманих результатів проводили у ліцензійному пакеті Statistica 6.1 із застосуванням непараметричних методів оцінки отриманих результатів.Результати досліджень та їх обговорення. При застосуванні розчину лактопротеїну з сорбітолом через 1 добу після опікового ураження шкіри спостерігаються більші середні значення показника S-фази (на 39,4 %, р<0,05), порівняно з групою після опіку з корекцією 0,9 % розчину NaCl, однак вони залишаються значно меншими (на 35,4 %, р<0,05) відносно середніх значень даного показника в групі без опікового ушкодження. Також спостерігаються більші значення індексу проліферації (на 38,6 %, р=0,076) в групі “опік + лактопротеїн з сорбітолом” порівняно з групою “опік + 0,9 % розчин NaCl”. В цей же термін спостереження при астосуванні HAES -LX -5 % на тлі опіку шкіри, порівняно з аналогічними показниками групи “опік + 0,9 % розчин NaCl”, суттєво меншими виявились показники фаз G0G1 (на 4,8 %, р<0,05) та інтервалу SUB -G0G1 (на 34,9 %, р<0,01) і більшими показники S-фази (на 41,1 %, р<0,05) та індекс проліферації (на 32,7 %, р<0,05). При порівнянні показників клітинного циклу клітин селезінки між групами “опік + лактопротеїн з сорбітолом” та “опік + HAES -LX -5 %” через 1 добу експерименту встановлено лише достовірно (р<0,05) на 30,3 % менші значення інтервалу SUB -G0G1 при застосуванні HAES -LX -5 %. Таким чином, вже через 1 добу після опіку шкіри розчином лактопротеїну з сорбітолом більш суттєво впливав на синтетичні процеси, а HAES -LX -5 % – на процеси як снтезу ДНК, так і апоптозу порівняно із застосуванням 0,9 % розчину NaCl. Подібна картина за характером впливу даних препаратів на показники клітинного циклу клітин селезінки була і через 3 та 7 діб після опікового ураження шкіри. Зокрема, порівняно з показниками групи “0,9 % розчину NaCl без опіку” через 3 доби, на фоні опіку та корекції розчином лактопротеїну з сорбітолом більшими виявились середні значення блока проліферації, а на тлі корекції розчином HAES -LX -5 % вищими були середні значення показників фази S і блока проліферації та меншими – інтервалу SUB -G0G1. Через 7 діб після опіку шкіри відмінностей при впливі на показники клітинного циклу клітин селезінки між розчинами лактопротеїну з сорбітолом та HAES -LX -5 % ми не виявили. Однак в обох цих групах були встановлені більші середні значення показників S-фази, блока проліферації та інтервалу SUB -G0G1 порівняно з середніми значеннями аналогічних показників групи “опік + 0,9 % розчину NaCl”.Висновки. Застосування розчинів лактопротеїну з сорбітолом або HAES -LX -5 % на тлі опікового ушкодження шкіри сприяють більш ефективному процесу оновлення клітин селезінки шляхом стимуляції синтезу ДНК та меншого рівня апоптозу, особливо при застосуванні HAES -LX -5 %.uk-UA
dc.formatapplication/pdf
dc.languageukr
dc.publisherТернопільський державний медичний університет ім. І.Я. Горбачевськогоuk-UA
dc.relationhttps://ojs.tdmu.edu.ua/index.php/visnyk-nauk-dos/article/view/8627/8155
dc.rightsАвторське право (c) 2018 Вісник наукових дослідженьuk-UA
dc.rightshttps://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0uk-UA
dc.sourceBulletin of Scientific Research; No. 1 (2018)en-US
dc.sourceВестник научных исследований; № 1 (2018)ru-RU
dc.sourceВісник наукових досліджень; № 1 (2018)uk-UA
dc.source2415-8798
dc.source1681-276X
dc.source10.11603/2415-8798.2018.1
dc.subjectcell cycle indexesen-US
dc.subjectDNA fragmentationen-US
dc.subjectspleenen-US
dc.subjectratsen-US
dc.subjectskin burnsen-US
dc.subjectlactoprotein with sorbitolen-US
dc.subjectHAES-LX-5 %.en-US
dc.subjectпоказатели клеточного циклаru-RU
dc.subjectфрагментация ДНКru-RU
dc.subjectселезенкаru-RU
dc.subjectкрысыru-RU
dc.subjectожог кожиru-RU
dc.subjectраствор лактопротеина с сорбитоломru-RU
dc.subjectраствор HAES -LX -5 %.ru-RU
dc.subjectпоказники клітинного циклуuk-UA
dc.subjectфрагментація ДНКuk-UA
dc.subjectселезінкаuk-UA
dc.subjectщуриuk-UA
dc.subjectопік шкіриuk-UA
dc.subjectрозчин лактопротеїну з сорбітоломuk-UA
dc.subjectрозчин HAES-LX-5 %.uk-UA
dc.titleINDICATORS OF CELL CYCLE AND DNA FRAGMENTATION OF SPLEEN CELLS IN EARLY TERMS AFTER THERMAL BURNS OF SKIN ON THE BACKGROUND OF USING "LACTOPROTEIN WITH SORBITOL" OR HAES-LX-5 %en-US
dc.titleПОКАЗАТЕЛИ КЛЕТОЧНОГО ЦИКЛА И ФРАГМЕНТАЦИИ ДНК-КЛЕТОК СЕЛЕЗЕНКИ В РАННИЕ СРОКИ ПОСЛЕ ТЕРМИЧЕСКОГО ОЖОГА КОЖИ НА ФОНЕ ВВЕДЕНИЯ ЛАКТОПРОТЕИНА С СОРБИТОЛОМ ИЛИ HAES-LX-5 %ru-RU
dc.titleПОКАЗНИКИ КЛІТИННОГО ЦИКЛУ І ФРАГМЕНТАЦІЇ ДНК-КЛІТИН СЕЛЕЗІНКИ В РАННІ ТЕРМІНИ ПІСЛЯ ТЕРМІЧНОГО ОПІКУ ШКІРИ НА ФОНІ ВВЕДЕННЯ ЛАКТОПРОТЕЇНУ З СОРБІТОЛОМ АБО HAES-LX-5 %uk-UA
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/article
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion


Files in this item

FilesSizeFormatView

There are no files associated with this item.

This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record